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新闻资讯

细胞增殖检测四种常用要领:EdU、CCK-8、MTT与BrdU

2016-06-02
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会见量:

细胞增殖检测作为一种实验手艺要领, 不但在研究细胞的基本生物学特征中很是主要, 并且是剖析细胞状态、研究遗传性状和评估应激反应的一种基本要领。 。。。CA88提供迅速度高、经济的细胞增殖检测效劳。 。。。常用的检测要领主要包括BrdU、CCK-8和EdU等,,,,,,其中EdU检测要领较为先进。 。。。我们拥有专业的细胞实验团队为您提供效劳,,,,,,如需相识更多详情,,,,,,请与我们联系。 。。。

备注:若是细胞株需要购置,,,,,,相关细胞用度和运费由客户支付。 。。。

细胞增殖检测


细胞增殖检测要领

要领一:EdU

EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,,,,,,能够在细胞增殖时期取代胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中。 。。。该要领可以通过基于EdU与Apollo?荧光染料的特异性反应快速检测细胞 DNA 复制活性,,,,,,适用于细胞增殖、细胞分解、生长与发育、DNA 修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,,,,,,尤其适合举行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。 。。。

与BrdU检测要领相比,,,,,,EdU检测要领更快速、更迅速、更准确。 。。。EdU与T结构很是相似,,,,,,而EdU染料分子量只有BrdU抗体的1/500,,,,,,在细胞内很容易扩散,,,,,,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),,,,,,可有用阻止样品损伤,,,,,,并且无需抗原抗体反应,,,,,,能在细胞和组织水平更快速、更准确地反应 DNA 复制活性。 。。。

细胞增殖检测

要领二:CCK-8

Cell Counting Kit-8(简称CCK-8试剂盒)是一种基于WST-8的快速高迅速度检测试剂盒,,,,,,普遍应用于细胞增殖和细胞毒性检测。 。。。WST-8是一种类似于MTT的化合物,,,,,,在电子耦合试剂保存的情形下,,,,,,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原天生橙黄色的formazan。 。。。细胞增殖越快、数目越多,,,,,,则颜色越深;; ;;;药物毒性越大,,,,,,细胞殒命越多,,,,,,则颜色越浅。 。。。关于同样的细胞,,,,,,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。 。。。

CCK-8法与MTT法原理相同,,,,,,差别之处在于CCK-8法天生的formazan是水溶性的,,,,,,不需要再吸出作育液加入有机溶剂消融这个办法,,,,,,因此可以镌汰一定的误差。 。。。其他优点就是重复性优于MTT;; ;;;对细胞毒性小 。。;; ;;;为1瓶溶液,,,,,,毋需预制,,,,,,即开即用。 。。。可是CCK-8比MTT的价钱要贵不少。 。。。

效劳内容:接纳CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒检测细胞增殖与细胞毒性,,,,,,CCK-8为MTT法的替换要领,,,,,,可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定及肿瘤药敏试验。 。。。


要领三:MTT

MTT法又称MTT比色法,,,,,,是一种检测细胞存活与生长的要领。 。。。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,,,,,,而死细胞无此功效。 。。。二甲基亚砜(DMSO)能消融细胞中的甲瓒,,,,,,用酶联免疫检测仪在490nm波优点测定其光吸收值,,,,,,可间接反应活细胞数目。 。。。在一定细胞数规模内,,,,,,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。 。。。该要领已普遍用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。 。。。

优点:经济、迅速度高,,,,,,适用于大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。 。。。

弱点:由于MTT经还原所爆发的formazan结晶产品不溶于水,,,,,,需加入有机溶剂消融后才华检测,,,,,,这不但增添了事情量,,,,,,也会对实验效果的准确性爆发影响,,,,,,并且有机溶剂对实验职员康健有潜在危害。 。。。

效劳内容:细胞作育与接种、处置惩罚(如药物处置惩罚等)、MTT检测及数据剖析、手艺效劳报告提交。 。。。


要领四:BrdU
Brdu,,,,,,即5-Bromo-2'-Deoxyuridine,中文全名5-溴脱氧尿嘧啶核苷,,,,,,为胸腺嘧啶的衍生物,,,,,,可取代胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),,,,,,活体注射或细胞作育加入,,,,,,此后使用抗Brdu单克隆抗体举行ICC染色,,,,,,显示增殖细胞。 。。。同时连系其它细胞标记物举行双重染色,,,,,,可判断增殖细胞的种类和增殖速率,,,,,,对研究细胞动力学具有主要意义。 。。。

BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)法检测细胞增殖原理:BrdU是胸腺嘧啶的衍生物,,,,,,常用于标记活细胞中新合成的DNA,,,,,,可取代胸腺嘧啶选择性整合到复制细胞中新合成的DNA中(细胞周期S期)。 。。。这种掺入可以稳固保存,,,,,,随着DNA复制进入子细胞中。 。。。 BrdU 特异性抗体可以用于检测BrdU的掺入,,,,,,从而判断细胞的增殖能力。 。。。

操作注重事项:由于BrdU 是光敏型,,,,,,以是必需在黑漆黑加入。 。。。细胞加了 BrdU 以后也可能光敏感,,,,,,因此也在黑漆黑作育。 。。。加入BrdU 的时间和浓度凭证细胞的类型和复制时间来确定,,,,,,规模为 15 分钟到 2 个小时,,,,,,浓度为 10μM 到 100μM。 。。。

例如,,,,,,鼠胚胎成纤维细胞的处置惩罚条件为:30μM BrdU处置惩罚60分钟。 。。。

CA88细胞水平测定效劳

细胞毒性剖析
细胞凋亡检测剖析
细胞迁徙剖析
细胞侵袭剖析
HTRF 细胞水平检测剖析
免疫染色剖析
免疫荧光剖析(96/384 孔板)
报告基因剖析(绿色荧光卵白/荧光素酶)
放射性配体受体连系试验
细胞摄取剖析
基因敲除剖析
MicroRNA过表达剖析
MicroRNA 敲除剖析
有关腺病毒/逆转录病毒/慢病毒 载体的应用剖析

CA88建设了100多种细胞株用于细胞水平测定。 。。。

包括:
乳腺癌细胞
大肠癌细胞
白血病细胞
肝癌细胞
肾癌细胞
肺癌细胞
黑素瘤细胞
卵巢癌细胞
胰腺细胞
胃癌细胞

联系CA88

邮箱:marketing@medicilon.com.cn

电话:02158591500


以上是关于细胞增殖检测手艺、细胞增殖检测要领等内容,,,,,,信息泉源于CA88官网。 。。。

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